Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 2019 , Vol 25 , Sayı 5
Effect of Inhibin-βA Subunit Gene on Reproductive Performance of Kazakh Sheep in Non-breeding Season
Zongsheng ZHAO1, Mengting ZHU1, Shaoqi CAO1, Manjun ZHAI1, Heng YANG1, Ying NAN1
1College of Animal Science and Technology, Shihezi University, Shihezi, Xinjiang, 832003, PR CHINA DOI : 10.9775/kvfd.2018.21414 İnhibin-βA (INHBA), folikül stimule edici hormon (FSH) sentez ve salınımını baskılayabilir ki bu durum koyunlarda yavru sayısı ile ilişkili olabilir. Bu çalışmada, inhibin-βA geni aday gen olarak değerlendirilerek Kazak koyunları çalışma materyali olarak kullanıldı. Genin polimorfizmi PCR-SSCP metodu ile belirlendi ve yavru sayısı ile ilişkisi analiz edildi. Elde edilen sonuçlar, Kazak koyununda ekzon 5"UTR bölgesinde AA, AB ve BB için üç polimorfizmin bulunduğunu gösterdi (primer 0-2). Korelasyon analizi, Kazak koyununda genotip AA"da 0.13 kuzu bulunduğunu (P<0.05) ve AA genotipinde AB ve BB genotiplerinden 0.16 daha fazla (P<0.05) kuzu bulunduğun gösterdi. Bu çalışmada INHBA ekspresyonuna etkiyen PLLU2G-shINHBA-1 (I-1), PLLU2G-shINHBA-2 (I-2), PLLU2G-shINHBA-3 (I-3) ve PLLU2G-INHBA-4 (I-4)"ü içeren vektörler, RNA interferans (RNAi) teknolojisi ile oluşturuldu. Başarıyla ayrılan ovaryum granuloza hücreleri vektörler ile transfekte edildi ve gen ekspresyon seviyesi kantitatif RT-PCR ile belirlendi. Sonuçlar dört vektörün, sırasıyla %34, %58, %39 ve %19 gen susturma etkinlikleri ile INHBA mRNA seviyelerini baskıladığını ve daha iyi interferans verimi I-2 olduğunu göstermiştir. INHBA ve serum FSH, luteinize edici hormon (LH) ve östradiol (E2) seviyeleri I-2"nin intraovaryan enjeksiyonu sonucu ölçüldü. Sonuçlar, INHBA seviyesinin düştüğünü ve serum FSH seviyesinin arttığını, LH ve E2 seviyelerinin ise değişmediğini ve böylece RNAi vektörünün in vivo INHBA ekspresyonunu başarıyla susturabildiğini gösterdi. Bu çalışma koyunların üreme ve östrus özelliklerini araştırma amacıyla iyi bir teorik temel oluşturmuştur. Kısa saç tokası (shRNA) vektörü, koyun veriminin arttırılması amacıyla uygulamada kullanılabilir. Anahtar Kelimeler : İnhibin-βA (INHBA), Kazak koyunu, RNA interferans (RNAi),Ovaryum granular hücreleri, Üreme performansı