¹Key Laboratory of Control and Prevention of Animal Disease of Xinjiang Production & Construction Corps, College of Animal Science and Technology, Shihezi University, Shihezi, Xinjiang, 832003, CHINA
²College of Animal Science and Technology, Xinjiang Agricultural Vocational and Technical College, Changji, Xinjiang 31100, CHINA
³State Key Laboratory for Sheep Genetic Improvement and Healthy Production, Xinjiang Academy of Agricultural and Reclamation Science, Shihezi, Xinjiang, 832000, CHINA DOI : 10.9775/kvfd.2018.20603 Çitinaz, enfeksiyon sürecinde nematod tutucu mantar tarafından üretilen önemli bir virulans faktörüdür ve nematodların yumurta kabuklarından ayrılmalarında önemli rol oynar. Bu çalışmada, Arthrobotrys oligospora çitinaz AO-379 cDNA sekansı RT-PCR ile amplifiye edildi ve Pichia pastoris GS115"de AO-379 ekspresyonunu oluşturmak amacıyla pPIC9K vektörüne yerleştirildi. Rekombinant AO-379 (reAO-379) nikel iyon affinite kromotografi ile saflaştırıldı, enzim özellikleri ve nematod indirgeme aktivitesi araştırıldı. SDS-PAGE ve Western blot analizleri yaklaşık 44 kDa moleküler ağırlığında olan reAO-379"ın başarıyla elde edildiğini gösterdi. reAO-379 pH 5.5 ve 30°C"de güçlü çitinaz aktivitesi gösterdi. reAO-379 ile Strongylus equinus, Caenorhabditis elegans ve Haemonchus contortus 12, 24 ve 36 saat muamele edildiklerinde sırasıyla S. equinus için %42, %89 ve %100, C. elegans için %50, %90 ve %97 ve H. contortus için %53, %62 ve %84 öldürme oranlarına sahip olduğu gözlemlendi. Fasciola hepatica ve Dicrocoelium chinensis yumurtaları reA-379 ile 24, 48 ve 72 saat muamele edildiğinde, indirgenme oranları F. hepatica yumurtalarında sırasıyla %12, %43 ve %65 iken D. chinensis yumurtalarında sırasıyla %15, %33 ve %55 olarak belirlendi. Bu çalışma, reAO-379"un yetiştiricilikte sindirim sistemi nematodlarına karşı potansiyel bir biyolojik kontrol ajan olarak kullanılabileceğini göstermiştir. Anahtar Kelimeler : Çitinaz AO-379, Moleküler özellikler, Ekspresyon, Nematod-indirgeyici aktivite, Arthrobotrys oligospora