¹College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Institute of Science and Technology, Xinxiang 453003, CHINA
²Forage and Feed Station of Henan Province, Zhengzhou 450008, CHINA DOI : 10.9775/kvfd.2022.27691 Primerler ve karşılık gelen problar, Streptococcus suis ve Actinobacillus pleuropneumoniae"nin eş zamanlı hızlı identifikasyonu sağlayan bir dual rekombinant enzim polimeraz amplifikasyon (RPA)-lateral fl ow dipstick (LFD) teşhis metodunun geliştirilmesi için ilgili bakterilerin sırasıyla glutamat dehidrojenaz (gdh) geni ve ApxIV geni için tasarlanmıştır. Yapılan özgüllük testinde, diğer patojenler için amplifikasyon sonuçlarının hepsinin negatif saptanması bu yöntemin iyi bir özgüllük sergilediğini gösterdi. Duyarlılık testi, bu yöntemle saptanabilen en düşük nükleik asit konsantrasyonunun10-5 ng/μL olduğunu gösterdi ve bu değer, PCR ve temel RPA ile saptananlardan önemli ölçüde daha yüksekti. Sonuçlar, bu yöntemin, PCR ile saptananlarla tutarlı olarak tüm referans suşları ve klinik izolatları belirlediğini gösterdi. 45 klinik örnek arasından 19"u S. suis ve 1"i A. pleuropneumoniae olarak saptandı ve miks enfeksiyon tespit edilmedi. Tespit oranı, bakteri izolasyonu ve geleneksel PCR yöntemine göre daha yüksekti, bu da bu yöntemin oldukça pratik olduğunu ve S. suis ve A. pleuropneumoniae"nin hızlı klinik tespiti için uygun olduğunu gösterdi. Geleneksel yöntemle karşılaştırıldığında, dual RPALFD yönteminin yüksek özgüllük, yüksek hassasiyet, hız ve minimum alet ve ekipman gereksinimi gibi birçok avantajı vardır. Ayrıca bu yöntem, S. suis ve A. pleuropneumoniae"nin eşzamanlı ve hızlı tanısını sağlayabilecek ve klinik enfeksiyonların ön taramasına yardımcı olabilecek niteliktedir. Keywords : Streptococcus suis, Actinobacillus pleuropneumoniae, Recombinase polymerase amplification, Lateral fl ow dipstick, Rapid detection