¹College of Animal Science, Yangtze University, No.88, Jingmi Road, Jingzhou, 434025, CHINA
²Key Laboratory of Prevention and Control Agents for Animal Bacteriosis (Ministry of Agriculture), Institute of Animal Husbandry and Veterinary Sciences, Hubei Academy of Agricultural Sciences, No.29, Nanhu Road, Wuhan, 430064, CHINA
³Engineering Research Center of Ecology and Agricultural Use of Wetland, Ministry of Education, Yangtze University, No.88, Jingmi Road, Jingzhou, 434025, CHINA
⁴State Key Laboratory of Developmental Biology of Freshwater Fish, School of Life Sciences, Hunan Normal University, Changsha 410081, CHINA DOI : 10.9775/kvfd.2020.24179 Gıda kaynaklı fırsatçı bir patojen olan Listeria monocytogenes, çevresel koşullara tepki olarak kendi özelliklerini başarılı bir şekilde değiştirebilir. L. monocytogenes"te, onaltı adet iki bileşenli sistemin (TCS) bakterilerin çeşitli durumları algılamasına ve adaptasyonuna katkıda bulunduğu belirlenmiştir. Önceki genomik çalışmamız, on altı TCS"den Lm850658 ve M7 arasındaki histidin kinaz gen yycG"de mutasyon gözlendiğini göstermiştir. YycFG TCS"nin diğer birçok Gram pozitif bakteride önemli roller oynadığı belirlenmiştir. Oysa L. monocytogenes"teki YycFG TCS"nin rolü hala tam olarak bilinmemektedir. Bu çalışmada, yycG"nin L. monositogenes"in patojenisitesinde rol oynayıp oynamadığını belirlemeyi amaçladık. Yaban tipi Lm850658 suşunu ve tamamlayıcı bir suşu (CΔyycG) temel alan bir histidin kinaz geni yycG silme suşu (ΔyycG) oluşturduk. YycG"nin silinmesinin büyüme kabiliyetini ve hareketliliğini önemli ölçüde bozduğunu, ancak in vitro hemoliz yeteneğini artırdığını bulduk. Ek olarak, hücre ve fare modelindeki enfeksiyon deneyleri, ΔyycG"nin enfeksiyon yeteneği ve virülansta önemli ölçüde kusurlu olduğunu gösterdi. ΔyycG"nin tüm bu fenotipleri, gen tamamlaması ile büyük ölçüde yaban tipi Lm850658 suşunun düzeyine tersine çevrilebilir. Hücre duvarı ilişkili ve salgılanan proteinler analizi, ΔyycG"nin salgılanan miktarının önemli ölçüde arttığını gösterdi. Western blot analizi, ΔyycG"nin salgılanan fraksiyonlarında; sırasıyla azalmış yapışma ve invazyon yeteneğinden ve artmış hemolitik aktiviteden sorumlu olabilecek Internalin protein B (InlB) ve Listerolysin O"nun (LLO) belirgin şekilde arttığını ortaya koydu. Histidin kinaz yycG"nin L. monocytogenes patojenitesinde önemli roller oynadığı ilk kez belirlendi. YycFG TCS"nin büyümeyi, hareketliliği, hücre yüzeyi proteinlerinin translokasyonunu ve virülansı nasıl değiştirdiğini belirlemek için ileri araştırmalara ihtiyaç vardır. Keywords : Listeria monocytogenes, İki bileşenli sistem, Histidin kinaz yycG, Patojenite