Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi
2020 , Vol 26 , Sayı 5
Protective Effects of Adenovirus-Mediated Overexpression of Heat Shock Protein 70 (HSP70) in Rat Liver Cells Against Oxidative Stress
1College of Animal Science and Veterinary Medicine, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing, CHINA
DOI :
10.9775/kvfd.2020.24079
Bu çalışma, sıçan karaciğer hücrelerinde Adenovirüs aracılı ısı şok protein 70 (HSP70) overekspresyonunun oksidatif strese karşı koruyucu
etkilerini araştırmayı amaçlamıştır. Kültürlenmiş Buffalo Rat Karaciğer hücreleri (BRL-3A) altı gruba ayrıldı. SH ve CH grupları Ad-CMV-HSP70
ile transfekte edildi, SN ve CN grupları Ad-CMV-Null ile transfekte edildi ve SC ve CC grupları 48 saat boyunca aynı koşullar altında adenovirüs
olmaksızın işlem uygulandı. SH, SN ve SC gruplarına 3 saat boyunca 500 μM H2O2 uygulandı ve CH, CN ve CC grupları, aynı koşullar altında
H2O2 olmaksızın işleme tabi tutuldu. Her grubun hücreleri için aşağıdaki parametreler belirlendi: proliferasyon hızı, laktik dehidrojenaz (LDH)
salınım oranı, katalaz (CAT), glutatyon peroksidaz (GSH-Px) ve süperoksit dismutaz (SOD) enzim aktiviteleri ve glutatyon (GSH) ve protein
karbonil içeriği. Ek olarak, HSP70 mRNA çokluğu ve HSP70 protein ekspresyon seviyeleri, sırasıyla kantitatif gerçek zamanlı PCR (qRT-PCR)
ve western bloting kullanılarak incelendi. Sonuçlar, SC grubundaki hücrelerle karşılaştırıldığında, SH grubundaki hücrelerin daha yüksek
proliferasyon oranına (P<0.01), CAT aktivitesine (P<0.01), GSH içeriğine (P>0.05), SOD aktivitesine (P>0.05), ve protein karbonil içeriğine
(P<0.01), daha düşük bir LDH salınım oranı (P<0.01) ve GSH-Px aktivitesine (P0.05) ve daha yüksek HSP70 mRNA varlığı (P<0.01) ve HSP70
protein ekspresyon seviyesine (P<0.01) sahip olduğunu gösterdi. Özetle, HSP70"in Adenovirüs aracılı overekspresyonu, H2O2"nin neden
olduğu oksidatif strese karşı koruyucu etkilere sahiptir.
Anahtar Kelimeler :
HSP70, BRL-3A, Oksidatif stres, Adenovirus vektörü, Soğuk stresi