Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 2022 , Vol 28 , Issue 2
Effects of Melatonin Addition to the Cold Storage Medium on Cumulus Oocyte Complex Apoptosis, Viability and In Vitro Maturation Rates of Cat Oocytes
Ramazan ARICI1, Kemal AK1, Serhat PABUCCUOĞLU1, Sema BİRLER1, Kamber DEMİR1, Selin YAĞCIOĞLU1, Ahmet ESER1, Nur ERSOY1, İdil ORUÇ1, Gül BAKIRER ÖZTÜRK2, Evrim KÖMÜRCÜ BAYRAK3, Bilge ÖZSAİT SELÇUK3, Andaç KILIÇKAP4, Mithat EVECEN1
1Department of Reproduction and Artificial Insemination, Faculty of Veterinary Medicine, Istanbul University-Cerrahpaşa, TR-34320 Avcılar, İstanbul - TÜRKİYE
2Department of Laboratory Animals Biology, Institute of Aziz Sancar Experimental Medicine, Istanbul University, TR-34393 Fatih, İstanbul - TÜRKİYE
3Department of Genetic, Institute of Aziz Sancar Experimental Medicine, Istanbul University, TR-34393 Fatih, İstanbul - TÜRKİYE
4Istanbul Medeniyet University, Science and Advanced Technologies Research Center (BILTAM), TR-34700 İstanbul - TÜRKİYE
DOI : 10.9775/kvfd.2021.26659 İn vitro embriyo üretimi amacıyla, ovaryumların soğuk ortamlardada uzun süreli saklanması sonrası elde edilen oositlerin kullanılabilmesi, yaban hayatı ve nesli tükenmekte olan türlerin korunmasına yardımcı olabilir. Memeli gametleri, plazma zarlarındaki yüksek lipid içeriği nedeniyle, oksidatif strese karşı savunmasızdırlar. Melatonin, toksik oksijen türevlerini ortadan kaldırma ve reaktif türlerin oluşumunu azaltma özelliğinden dolayı güçlü bir antioksidan ve anti-apoptotik ajan olarak bilinmektedir. Çalışma, 4°C"de 24 saat süreyle muhafaza edilen ovaryum taşıma sıvısına (%0.9 NaCl) antioksidan olarak farklı dozlarda melatonin (500, 750 ve 1000 μM) eklenerek evcil kedi ovaryumlarının uzun süreli muhafazası için en uygun koşulları belirlemek amacıyla yapılmıştır. Melatoninin soğukta bekletilmiş ovaryumlardan kazanılan kedi oositleri üzerindeki etkisini belirlemek amacıyla; kümülüs ooforuslardaki anti ve proapoptotik gen seviyeleri, oositlerdeki in vitro olgunlaşma oranları, hücre membran stabilitesi ve hücre canlılığı gibi parametreler incelendi. Soğukta bekletilsin ya da bekletilmesin, tüm melatonin ilaveli gruplarda; kümülüs hücrelerindeki pro-apoptotik gen seviyelerinin (Bax) yükseldiği, buna karşın anti-apoptotik gen seviyelerinin ise (Bcl-2) düştüğü gözlendi (P<0.05). Oositlerin hücre membran stabilitesi ve hücre canlılık oranları da melatonin artışına paralel olarak bozulmaya başladığı görüldü. Bu bulgulara paralel olarak, melatonin miktarı arttıkça oositlerin in vitro olgunlaşma oranları da olumsuz yönde etkilendi (P≤0.001). Sonuç olarak, yumurtalık saklama sıvısına 500, 750 ve 1000 μM dozlarında melatonin eklenmesinin, kümülüs hücrelerinde apotozu teşvik ettiği, kedi oositinin in vitro olgunlaşma oranları, hücrelerin canlılığı ve hücre membran yapısı üzerinde de olumsuz etkileri olduğu sonucuna varıldı. Keywords : Cold storage, Melatonin, Cat ovaries, In vitro maturation, Apoptosis, Bax, Bcl-2