¹Trakia University, Faculty of Veterinary Medicine, Department of Veterinary Microbiology, Infectious and Parasitic Diseases, 6000 Stara Zagora, BULGARIA
²University of Forestry, Faculty of Veterinary Medicine, 10 Kliment Ohridski Str. 1756 Sofia, BULGARIA
³Medical University, Department of Medical Microbiology, 2, Zdrave Str. 1431 Sofia, BULGARIA
⁴National Reference Laboratory “Enzootic Bovine Leukosis” (2013-2015), Department of Virology and Viral Diseases, National Diagnostic and Research Veterinary Medical Institute, 15, Pencho Slaveykov Blvd., 1606 Sofia, BULGARIA DOI : 10.9775/kvfd.2021.26505 Bu çalışmanın amacı, agar jel immünodifüzyon testi (AGID) ve iki tip PCR"nin, nested PCR (kandan nükleik asit ekstraksiyonu ile birlikte) ve kanda direkt nested PCR (db nested PCR) - ekstraksiyon olmaksızın, tanısal yeteneklerinin bu hastalığın rutin teşhisinde altın standart olarak kullanılan Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ile karşılaştırılmasıydı. Çalışmada, 18 ay ile 5 yaş arası sığırlardan toplam 409 kan örneği toplandı ve tüm örnekler bu dört yöntem ile analiz edildi. İlk analizleri takiben, örnekler -20°C"de saklandı ve sonuçların tekrarlanabilirliği açısından bir aylık dondurularak depolamanın ardından dört yöntem ile yeniden analiz edildi. ELISA ile 57 (%13.9) hayvan pozitif saptanırken, AGID ile 33 ve her iki tip nested PCR ile 56 hayvan pozitif saptandı. ELISA"ya kıyasla AGID, %57.9"luk düşük sensitivite ve orta düzeyde uyum gösterdi. Ayrıca AGID, iki bağımsız ölçümden elde edilen sonuçlarla da tutarlılık göstermedi. İki tip nested PCR yöntemi de 0.99 kappa değeriyle ELISA ile neredeyse tam uyum gösterdi. Bu çalışmada kullanılan diğer tekniklere kıyasla AGID, 22 örnekte daha düşük sensitivite gösterdiği için ve tekrarlanabilirliği olmadığı için kan örneklerinde Enzootik sığır lökozunun teşhisinde bu testin gelecekte uygulanmasının yeniden düşünülmesi gerektiğini öneriyoruz. Diğer taraftan, db nested PCR çok iyi bir sensitivite ve tekrarlanabilirlik gösterdi, ayrıca daha az örnek işlenmesine ihtiyaç duydu. Bütün bunlar, db nested PCR"yi rutin teşhis için potansiyel olarak uygun hale getirmektedir. Keywords : AGID, karşılaştırma, db nested PCR, ELISA, Enzootik sığır lökozu, nested PCR