This journal is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License
Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi
2021 , Vol 27 , Issue 1
Deletion of lpsA Gene of Brucella melitensis Strain M5-90 Promotes Caspase-11 Induced Non-classical Pathways Pyroptosis in Brucella-infected Mouse Macrophage Cells
1Department of Veterinary Medicine, College of Animal Science and Technology, Shihezi University, 832000-Shihezi, Xinjiang Uygur Autonomous Region, CHINA2School of Life Sciences, Shihezi University, 832000-Shihezi, Xinjiang Uygur Autonomous Region, CHINA
3School of Life Sciences, Shihezi University, 832000-Shihezi, Xinjiang Uygur Autonomous Region, CHINA
4Department of Forestry, College of Agriculture, Shihezi University, 832000-Shihezi, Xinjiang Uygur Autonomous Region, CHINA
5Department of Basic Medicine, School of Medicine, Shihezi University, 832000-Shihezi, Xinjiang Uygur Autonomous Region, CHINA DOI : 10.9775/kvfd.2020.24820 Brucella, ökaryotik konakçılarla ilişkili enfeksiyon döngüsünü ve yaşam biçimini düzenlemek için çeşitli virülens faktörlerini kullanır. Lipopolisakkaritler (LPS), Brucella"nın kalıcı enfeksiyonlarının oluşmasında önemli bir rol oynar, ancak konakçı hücrede, Brucella"nın ortadan kaldırılmasıyla ilgili konakçının spesifik sinyalizasyonuna müdahale etme mekanizması halen net değildir. Bir glikozil transferaz olan LpsA, LPS"nin biyosentezinde görev alır ve Brucella"nın hücre içi yaşama yeteneğini etkileyebilir. Bu çalışmada lpsA"nın Brucella ile enfekte makrofaj hücrelerinde piroptoz üzerine etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Piroptozu saptamak için Brucella melitensis M5-90 suşunun lpsA mutantı (M5-90ΔlpsA) ve komplementer suşu (M5- 90ΔlpsA-C) ile enfekte olmuş fare makrofajları oluşturduk. LpsA geninin inaktivasyonunun, LPS"nin Brucella mutant enfeksiyonları sırasında sitozole giriş yeteneğini zayıfl attığını ve Brucella"nın yaşama yeteneğini azalttığını saptadık. Western Blot ve kantitatif real-time PCR deneyleri, M5-90 grubuna oranla M5-90ΔlpsA grubunda kaspaz-11 ve NOD-benzeri reseptör ailesi pyrin domain-containing 3"ün mRNA ve protein seviyelerinin daha yüksek olduğunu gösterdi. Bu bulgular, M5-90ΔlpsA"nın, Brucella enfeksiyonu sonrası bir fare makrofaj hücre hattı olan RAW264.7 hücrelerinde piroptoza yol açtığını gösterdi. Bu bulgu, Brucella lpsA"sının, LPS ile indüklenen atipik piroptoz yolunu inhibe ederek doğal bağışıklık ve enfl amatuar yanıtta kısmi bir rol oynadığını ortaya koymaktadır. Keywords : Brucella, lpsA, Canlılık, Piroptozis