Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 2020 , Vol 26 , Issue 5
Protective Effects of Adenovirus-Mediated Overexpression of Heat Shock Protein 70 (HSP70) in Rat Liver Cells Against Oxidative Stress
Jingru GUO1, Huijie HU1, Hongrui LIU1, Jianbin YUAN1, Xu ZHANG1, Hong JI1
1College of Animal Science and Veterinary Medicine, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing, CHINA DOI : 10.9775/kvfd.2020.24079 Bu çalışma, sıçan karaciğer hücrelerinde Adenovirüs aracılı ısı şok protein 70 (HSP70) overekspresyonunun oksidatif strese karşı koruyucu etkilerini araştırmayı amaçlamıştır. Kültürlenmiş Buffalo Rat Karaciğer hücreleri (BRL-3A) altı gruba ayrıldı. SH ve CH grupları Ad-CMV-HSP70 ile transfekte edildi, SN ve CN grupları Ad-CMV-Null ile transfekte edildi ve SC ve CC grupları 48 saat boyunca aynı koşullar altında adenovirüs olmaksızın işlem uygulandı. SH, SN ve SC gruplarına 3 saat boyunca 500 μM H2O2 uygulandı ve CH, CN ve CC grupları, aynı koşullar altında H2O2 olmaksızın işleme tabi tutuldu. Her grubun hücreleri için aşağıdaki parametreler belirlendi: proliferasyon hızı, laktik dehidrojenaz (LDH) salınım oranı, katalaz (CAT), glutatyon peroksidaz (GSH-Px) ve süperoksit dismutaz (SOD) enzim aktiviteleri ve glutatyon (GSH) ve protein karbonil içeriği. Ek olarak, HSP70 mRNA çokluğu ve HSP70 protein ekspresyon seviyeleri, sırasıyla kantitatif gerçek zamanlı PCR (qRT-PCR) ve western bloting kullanılarak incelendi. Sonuçlar, SC grubundaki hücrelerle karşılaştırıldığında, SH grubundaki hücrelerin daha yüksek proliferasyon oranına (P<0.01), CAT aktivitesine (P<0.01), GSH içeriğine (P>0.05), SOD aktivitesine (P>0.05), ve protein karbonil içeriğine (P<0.01), daha düşük bir LDH salınım oranı (P<0.01) ve GSH-Px aktivitesine (P0.05) ve daha yüksek HSP70 mRNA varlığı (P<0.01) ve HSP70 protein ekspresyon seviyesine (P<0.01) sahip olduğunu gösterdi. Özetle, HSP70"in Adenovirüs aracılı overekspresyonu, H2O2"nin neden olduğu oksidatif strese karşı koruyucu etkilere sahiptir. Keywords : HSP70, BRL-3A, Oksidatif stres, Adenovirus vektörü, Soğuk stresi