¹State Key Laboratory of Plateau Ecology and Agriculture, Qinghai University, Xining 810016, CHINA
²Key Laboratory of Adaptation and Evolution of Plateau Biota, Northwest Institute of Plateau Biology, Chinese Academy of Sciences, Xining, 810001, CHINA
³Laboratory of Plateau Fish Evolutionary and Functional Genomics, Northwest Institute of Plateau Biology, Chinese Academy of Sciences, Xining, 810001, CHINA DOI : 10.9775/kvfd.2019.23252 Ektodisplasin A (EDA) deri uzantılarının gelişiminde, özellikle balık pullarında, hayati bir rol oynar. CRISPR/Cas9 sistemi kullanılarak eda mutasyonlu zebra balığı modeli bulundu. Eda"nın ekson 4"ünde iki lokusu hedefleyen CRISPR/Cas9 nükleazları oluşturuldu ve zebra balığı embriyolarına enjekte edildi. Eda ekson 4"e yönelik CRISPR-Cas9 aracılı mutasyon sıklığı yaklaşık %16 idi; bu, zebra balığındaki diğer genlerinkine kıyasla nispeten düşüktü. F0 jenerasyonunda, hedeflenen bölge etrafında sırasıyla 5 bp, 6 bp, 8 bp ve 87 bp"lik bir silme ve 11 bp"lik bir ekleme dahil olmak üzere beş eda mutant türü elde edildi ve bunların hepsi sadece bir allelde gerçekleşti. Ancak tüm F0 üyelerinin pulları yabani akranlarına kıyasla normaldi. F1 jenerasyonunda, tamamı eda"ya bi-allelik 11-bp ilavesinden kaynaklanan az sayıda pulla çevrili beş adet pulsuz mutant elde edildi. Ekleme, eda"nın çerçeve kayması mutasyonuna neden olur ve Western Blot tekniği ile belirlendiği üzere EDA"nın ekspresyonunda azalma ve fonksiyon inaktivasyonuna yol açar. Bu çalışma, balık pullarının gelişiminde EDA"nın işlevini açıklamak için iyi bir model oluşturmaktadır. Keywords : Gen nakavt, eda, Zebra balığı mutantı, Pul kaybı