¹Osmaniye Korkut Ata University, Faculty of Arts and Sciences, Department of Biology, TR-80000 Osmaniye - TURKEY
²Çukurova University, Faculty of Agriculture, Department of Animal Science, TR-01330 Adana - TURKEY
³Çukurova University, Faculty of Fisheries, Department of Basic Sciences, TR-01330 Adana - TURKEY
⁴Recep Tayyip Erdoğan University, Faculty of Medicine, Department of Basic Medical Sciences, TR-53100 Rize - TURKEY DOI : 10.9775/kvfd.2012.8400 Bu çalışmada, rekombinant pTEG5 plazmit DNA"sına (pUC18 + Cellulosimicrobium cellulans"ın β-1,3-glukanaz geni) pLP3537 plazmitinin p353-2 kriptik plazmit bölgesinin aktarılması ile rekombinant pTE353-βG plazmit DNA"sı oluşturulmuştur. Rekombinant pTE353-βG plazmiti Lactobacillus plantarum"a elektroporasyon tekniği ile transfer edilmiştir. SacI enzimi ile kesilmiş pTE353-βG"nin agaroz jelde 1.9 kbç büyüklüğünde gen bandı üretmesinin yanı sıra, β-1,3-glukanaz genini şifreleyen 1.9 kbç büyüklüğündeki DNA parçasının PCR ile rekombinant vektörden amplifiye edilmesi genin plazmite entegrasyonunu göstermektedir. pTE353-βG içeren rekombinant L. plantarum kolonileri MRS-laminarin-agar plağında Congo-red boyaması ile β-1,3-glukanaz geninin eksprese olduğunu gösteren açık renkli pozitif zon vermişlerdir. Rekombinant suş tarafından üretilen enzim, C. cellulans enzimi ile aynı moleküler ağırlıkta aktivite bandı üretmiş ve böylece enzimin herhangi bir proteolitik parçalanmaya maruz kalmadığı anlaşılmıştır. Enzimatik analizler sonucunda L. plantarum tarafından üretilen β-1,3-glukanaz enziminin optimum sıcaklık ve pH değerleri sırasıyla 40°C ve 6.0 olarak bulunmuştur. Bu sonuçlar, rekombinant L. plantarum"un silajın aerobik bozulmasını önlemek için inokülant olarak düşünülebileceğini ortaya çıkarmıştır. Keywords : Cellulosimicrobium cellulans, β-1,3-Glukanaz, Lactobacillus plantarum, Klonlama, Gen ifadesi, Rek