Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi
2020 , Vol 26 , Sayı 6
Optimisation of Indirect ELISA by Comparison of Different Antigen Preparations for Detection of Antibodies Against Schmallenberg Virus
1Department of Virology, Faculty of Veterinary Medicine, Kirikkale University, TR-71450 Kirikkale - TURKEY2Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, Kirikkale University, TR-71450 Kirikkale - TURKEY
3Department of Parasitology, Faculty of Veterinary Medicine, Kirikkale University, TR-71450 Kirikkale - TURKEY DOI : 10.9775/kvfd.2020.24397 Schmallenberg virüs (SBV) enfeksiyonu 2011 yılında keşfedilmiş ve enfeksiyon Türkiye dahil Avrupa kıtasında, Afrika"da ve bazı Asya ülkelerinde bildirilmiştir. Ticari ELISA kitleri çok sayıda epidemiyolojik çalışmada ve SBV tanısında sıklıkla kullanılmaktadır. Bu çalışmanın amacı, hücre kültüründen elde edilen tam SBV partikülünün farklı antijen hazırlama yöntemleri kullanılarak indirekt in-house ELISA optimizasyonudur. Antijen hazırlamak için; PEG presipitasyon, ultrasantrifüjleme, diyaliz ve antijen inaktivasyonu gibi farklı yöntemler kullanıldı. Antijen optimizasyonu sonrasında, antijen kaplama, bloklama, konjugat ve durdurma solüsyonları optimize edildi ve geliştirilen in-house ELISA ticari ELISA kiti ile kıyaslandı. ELISA antijen hazırlanmasında en iyi sonuçlar %30 PEG presipitasyon sonrasında formaldehit ile inaktivasyon sonucunda elde edildi. SBV özgül antikorların belirlenmesinde in-house ELISA ticari kit kadar duyarlı ve özgül olsa da saf SBV antijeni temelli in-house ELISA geliştirilmesinin S/P oranını yükseltebileceği düşünüldü. Anahtar Kelimeler : Tanı, Diyaliz, ELISA, PEG, Schmallenberg virüs