Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 2019 , Vol 25 , Issue 5
The Effect of Single Amino Acid Substitution in SecA2 on Protein Translocation and Pathogenicity of Listeria monocytogenes
Chun FANG1, Xueyang CHEN1, Xiongyan LIANG1, Xiaowei FANG1, Keli GAO1, Jing CHEN1, Yufang GU1, Yuying YANG1
1School of Animal Science, Yangtze University, No.88, Jingmi Road, Jingzhou, 434025, CHINA
2Key Laboratory of Prevention and Control Agents for Animal Bacteriosis, Institute of Animal Husbandry and Veterinary, Hubei Academy of Agricultural Sciences, Wuhan, 430064, CHINA
DOI : 10.9775/kvfd.2018.21558 Listeria monocytogenes önemli bir zoonotik patojen olup immunsupresyone insanlarda yüksek mortaliteye sahip şiddetli listeriozise neden olur. L. monocytogenes enfeksiyonu ve patojenitesi sekresyon sistemi tarafından salınan çeşitli yüzey proteinleri tarafından oluşturulur. Yapılan önceki genomik çalışma virülent ve düşük-virülent suşların sekresyon sistemlerinin secA2 ve iki hollin genlerinde farklı olduğunu gösterdi. İki suşun patojenitelerindeki farkın sekresyon sistemlerinde gözlenen farktan kaynaklanıp kaynaklanmadığı araştırıldı. Çalışmada, patojenik fenotipleri karşılaştırmak amacıyla secA2 ve iki hollin geni çıkarıldı. Elde edilen sonuçlar iki hollin geninin değil de secA2 geninin patojenik fenotipi etkilediğini gösterdi. secA2 geninde tek baz mutantının protein patojenitesini ve SecA2"nin translokasyon kabiliyetini etkileyip etkilemediğini test etmek amacıyla secA2 gen delesyon mutant suşunu sırasıyla Asn567 ve Lys567"i kodlayan secA2Lm850658 ve secA2M7 ile tamamladık. Elde edilen veriler, secA2Lm850658 ile tamamlanan secA2 mutantının anlamlı derecede Caco-2 epitel hücrelerine adezyon ve invazyon kabiliyeti ile fare karaciğer ve dalak dokularında enfeksiyon sonrası 24 ve 48. saatlerde bakteriyel yığılmayı artırdığını gösterdi. Hücre yüzey protein analizi, sadece Asn567"li SecA2"nin protein translokasyon kabiliyetini koruyabildiğini gösterdi. Tüm sonuçlar değerlendirildiğinde, L. monocytogenes SecA2"de tek amino asit mutasyonunun protein translokasyonu ve patojeniteyi etkilediği ilk kez gösterilmiştir. Keywords : Listeria monocytogenes, Secretion system, SecA2, Pathogenicity