Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 2017 , Vol 23 , Issue 6
Development of PPA-ELISA for Diagnosing Streptococcus suis Infection Using Recombinant Sao-M Protein As Diagnostic Antigen
Xiaojing XIA1, Huihui ZHANG3, Likun CHENG4, Shouping ZHANG1, Lei WANG1, Shuguang LI4, Zhiqiang SHEN4, Gaiping ZHANG2, Jianhe HU1
1Postdoctoral Research Base, Henan Institute of Science and Technology, Xinxiang 453003, P.R. CHINA
2Post-doctoral Research Station, Henan Agriculture University, Zhengzhou 450002, P.R. CHINA
3College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Institute of Science and Technology, Xinxiang, 453003, P.R. CHINA
4Shandong Binzhou Animal Science &Veterinary Medicine Academy, Binzhou, 256600, P.R. CHINA
DOI : 10.9775/kvfd.2017.18110 Streptococcus suis, insanlarda enfeksiyona neden olan salgınlardan sorumlu önemli bir zoonotik ajandır. S. suis"in doğru ve hızlı bir şekilde tespit edilmesi enfeksiyona bağlı salgınları kontrol edebilir ve hastalığa bağlı etkileri azaltabilir. Bu çalışmada, Sao-M, S suis enfeksiyonunun teşhisi amacıyla peroksidaz enzim-bağlı stafilokokal protein A immün testi (PPA-ELİSA) için kullanılmıştır. Satranç tahtası titrasyon testinin sonuçları, kaplama antijeninin optimal konsantrasyonu ve serum sulandırılmasını sırasıyla 8 μg/mL ve 1:80 olarak göstermiştir. Pozitif cevap için eşik değeri OD450≥0.351 olarak belirlendi. Testin spesifitesi rSao-M"nin diğer 6 patojen türe karşı kullanılan antiserum ile çapraz reaksiyon vermediğini gösterdi. Tekrar testlerinde yığın içi ve yığınlar arası varyasyon katsayısı %9.5"ten az idi. Geleneksel ELİSA kiti ve kurulan GDH tabanlı ELİSA"nın karşılaştırmalı analizinde, mevcut PPA-ELİSA testinin GDH tabanlı ELİSA testinden daha yüksek spesifite ve sensitiviteye sahip olduğunu gösterdi. 500 domuz serumu örneğinde toplam seroprevalansın %6.6 olduğu ve bunun yöntemin S. suis enfeksiyonunun saptanmasında uygunluğunu gösterdi. Sonuçlar, PPA-ELİSA"nın hızlı, duyarlı ve spesifik bir tanı yöntemi olduğunu ve S. suis enfeksiyonunun serolojik tanısı için büyük kapsamlı epidemiyolojik araştırmalarda yeni bir araç olarak kullanılabilirliğini göstermektedir. Keywords : Streptococcus suis, PPA-ELISA, Sao-M, Tanı